LAPORAN PRAKTIKUM GENETIKA KROMATOGRAFI PIGMEN MATA PADA LALAT BUAH (D. Melanogater)

LAPORAN PRAKTIKUM GENETIKA

KROMATOGRAFI PIGMEN MATA PADA LALAT BUAH

(D. Melanogater)

 

Di SusunOleh :

AmaliaRatnasari

1001070004

Kelompok B

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2011

KROMATOGRAFI PIGMEN MATA PADA LALAT BUAH

(D. Melanogaster)

A.    Tujuan

-          Untukmengetahuiadanyakandunganpigmenmatapadalalatbuah (D. Melanogaster)

-          Untukmengamatikandunganpigmenmatadenganmenggunakansinar UV

-          Untukmembedakankandunganpigmenmatapadalalatbuah (D.Melanogaster)

-          Untukmengetahuiperbedaanjarakpigmen yang menyusunwarnamatalalatbuah (D.Melanogaster)

-          UntukmenghitungnilaiRfpadasetiapmutanhasilpengamatan

B.     TinjauanPustaka

Morgan menemukanadanyaperbedaankaraktermataputihpadalalatbuah (D. Melanogaster) kemudian beadle dantatumnenemukanjenis lain padawarnamatalalatbuah (D.Melanogaster). berbagaiperubahanpada gen (mutasi) dapatmempengaruhistruktur, fungsi, ataupengaturan protein yaituenzim.Akibatdarikerusakanataukecacatansatuataubeberapaenzim yang dibutuhkandalamjalurbiokimiadalamsintesispigmenmakawarnamutanmemilikiperbedaan.

Kehadiranpigmen-pigmenmataptierinmenyebabkanwarnamerahpadalalatbuah.Ptierindikelompokkanmenjadi 2 yaitu:

1.      Drosopterinyaitu yang menyebabkanwarnamatalalatbuahberwarnamerah yang dihasilkandarimetabolismepurin

2.      Ommokromyaitu yang menyebabkanwarnamatalalatbuahberwarnacoklat.

Teknikkromatografiadalahteknik yang paling sederhanadan paling tua.Namundenganperkembangannyailmupengetahuan, makateknikinimengalamibanyakkemajuanantara lain kromatografitekanantinggiatau HPLC yang mempunyaidayapisahbesar, kromatografifasa gas, kromatografikolom, kromatografiduadimensidan yang paling sederhanaadalahkromatografikertasdankromatografi lapis tipis.(sisunandar:2011)

Alasanmenggunakanteknikkertaskarenaprosedurnyasederhanadanlebihcepat, harganyarelatiflebihmurah, mempunyaisensitivitas yang tinggi, keceptanpemisahantinggikarenapori-porirapat, dandapatdigunakanuntukberbagaimacamsempel.

Selainkertaswhatmandalamteknikkromatografidapa pula digunakankertasselulosamurni.Kertasselulosa yang di modifokasidankertasseratkaca.Untukmemilihkertas, yang menjadipertimbanganadalahtingkatdankesempurnaanpemisahan, difusivitaspembentukan spot, efek tailing, pembentukankornetsertalajupergerakanpelarutterutamauntukteknik descending danjugakertasseharusnyapenolak air. SeringkalinilaiRfberbedadarisatukertaskekertaslainnya.(basset, 1994)

C.     AlatdanBahan

Alat:

-          Cawan petri

-          Botolkromatografi

-          Jarumpentul

-          Kertaswhatman

-          Penggaris

-          Strapless

-          Lampu ultra violet

-          Pensil

-          Alatpenjepit

-          Gunting

-          Bajanakromatografidengantutupgelas oven.

-          pinset

Bahan

-          Lalatbuah ( D. Melanogaster)

-          Lalatmutan (se, w, y)

-          Larutan NBA

D.    Cara Kerja

1.      Mengambildenganhati-hatisebuahkertaswhatman agar bagiantengahnyatidakterkenatangan.

2.      Mengukurkertaswhatmandenganhati-hati agar bagiantengahnyatidakterkenatangan 1 cm daribawahkemudiandipotong.

3.      Mengukurkembalikertaswhatman 2cm daribawah .

4.      Memberitandatitikdenganjarakmasing-masing 1 cm dengan symbol +, se, w, y menggunakanpensiluntuksetiapmutan.

5.      Membiusmutan (+, se, w, y )masing-masingsebanyak 30 ekoruntuksemuakelompok.

6.      Memasukkanmutan (+, se, w, y) kedalam alcohol 96% selama 1 menit.

7.      Merebusmutan ( +, se, w, y) kedalam air aquadesselama 1 menit

8.      Setiapkelompokmengambil 3 ekoruntuksetiapmutan( +, se, w, y) kemudianmemotongkepalamasing-masingmutan.

9.      Menggeruskepalalalatpadacawan petri kemudianmeletakkanlalatpadakertaswhatman yang sudah di berititikdanmenggerusnyalagidenganmenggunakanujungjarumpentul.

10.  Menggulungkertaswhatmandenganhati-hati agar bagianmuka yang adatitiknyatidakterkenatangan.

11.  Menyetrapleskertaswhatman agar kertasdapatberdiri.

12.  Memasukkankertaswhatmankedalambotol yang berisilarutan NBA, danmembiarkansampailautan NBA naik.

13.  Mengamatikertaswhatman di bawahsinar UV

14.  Mencatathasil yang diperoleh.

E.     Hasil

No	Mutan	A (Pigmenmata)	B (JarakPelarut)
1	Normal	4,5 cm	5,5 cm
2	Sepia	1,5 cm	5,5 cm
3	White	-	5,5 cm
4	Yellow	-	5,5 cm

Rf Normal =  =  = 0,81 cm ( Xanthopterin)

Rf Sepia =  =  = 0,28 cm ( Leucopterin)

  5,5 cm

                                    4,5 cm

                                                 1,5 cm

 

                                  +          se       w         y

F.      Pembahasan

Berdasarkkanpraktikum yang telahdilakukandiketahuibahwa:

Mutan normal memilikijarak A (pigmenmata) sebesar 4,5 cm danmemilikijarak B (pelarut) sebesar 5,5 cm. mutan sepia memilikijarak A (pigmenmata) sebesar 1,5 cm danmemilikijarak B (pelarut) sebesar 5,5 cm. mutan white tidakmemilikijarak A(pigmenwarna) danmemilikijarak B (pelarut) sebesar 5,5 cm. sedangkanmutan yellow tidakmemilikijarak A (pigmenmata) danmemilikijarak B sebesar 5,5 cm.

Padamutan normal dapat di hitungnilaiRf normal dengancaramembagijarak a (pigmenmata) denganjarak b (pelarut) ataudengan kata lain samadengan = 0,81. BerdasarkantabelhargaRfhasil 0,81mendekati 0,68 sehinggadapatdikelompokkankedalampigmensenyawaXanthopterin.

Padamutan sepia dapatdihitungnilaiRf sepia dengancaramembagijarak a (pigmenwarna) denganjarak b (pelarut) ataudengan kata lain  =  = 0,28. BerdasarkantabelhargaRfhasil 0,28mendekati 0,27 sehinggadapatdikelompokkankedalampigmensenyawaLeucoptrein.

Padamutan white tidakmemilikijarakpigmenmatatetapimemilikijarakpelarut 5,5 cm. halinimenunjukkanbahwamutan white tidakmemilikipigmenmatapadapraktikum yang telahdilakukan.

Sedangkanpadamutan yellow jugatidakmemilikijarakpigmenmatatetapimemilikijarakpelarutsebesar 5,5. Hal inijugamenunjukkanbahwa yellow tidakmemilikipigmenmatapadapraktikum yang telahdilakukan.

G.    Kesimpulan

-          Pengamatankromatografipigmenmatamenggunakankertaswhatman.

-          Kromatografiadalahmetodeuntukmengetahuiberbagaikandunganpigmenmatapdamutanlalatbuah ( D. Melanogaster)

-          Mutan normalmempunyaiRf 0,81 yang mendekatitabelhargaRf 0,81sehinggamengandungpigmenmataXanthopterin

-          Mutan sepia mempunyaiRf 0,28 yang mendekatitabelhargaRf 0,27 sehinggamengandungpigmenmataLeucopterin

-          Mutan white tidakmengandungpigmenmata

-          Mutan yellow tidakmengandungpigmenmata

DAFTAR PUSTAKA

Basset, J, et al. 1994.Buku Ajar Vogel; Kimia AnalisisKuantitatifAnorganik.BukukedokteranEGC: Erlangga

Sisunandar. 2011. PenuntunPraktikumGenetika. Purwokerto :UniversitasMuhammadiyahPurwokerto